547.4公里。根据查询百度地图得知，吉首位于湖南省西部、湘西土家族苗族自治州南部，毕节位于贵州省西北部、川滇黔三省交界、乌蒙山腹地，两地相距547.4公里，开车需要个小时27分钟。